Determinacion De Acido Urico En Suero

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO EN SUERO 1.

OBJETIVO

Calcular la concentración del ácido úrico en suero, pero también podemos obtenerla de la orina. 2.

INTRODUCCIÓN

El ácido úrico es producto del metabolismo de las purinas, ácidos nucleicos y nucleoproteínas, valores elevados indican patologías que afectan dichos metabolismos, algunas de origen genético. Habitualmente la concentración del ácido úrico varía de un individuo a otro de acuerdo a diversos factores tales como la edad, sexo, dieta, origen étnico, constitución genética, embarazo, etc. 3.

METABOLISMO DEL ÁCIDO ÚRICO Ácidos nucleicos Enzimas nucleasas

Nucleótidos

Base nitrogenada + azúcar + fósforo (Guanosín monofosfato)

GMP

Nucleótido fosfatasa

Base nitrogenada + azúcar

Guanosina Nucleósido fosforilasa

Guanina Guanina desaminasa

Xantina

AMP

(Adenosín monofosfato) Nucleótido fosfatasa

Adenosina Adenosina desaminasa

Inosina Nucleósido fosforilasa

Hipoxantina

Xantina oxidasa

Ácido úrico

Xantina Xantina oxidasa

Ácido úrico Xantina.- Producto intermedio de gran importancia en el metabolismo de los ácidos nucleicos y las bases purínicas. Precursor del ácido úrico, formado por la acción de la xantinooxidasa. Precursor también de compuestos presentes en los nucleósidos y los nucleótidos. Los tres derivados de xantina de mayor interés en medicina son: cafeína, teobromina y teofilina. Hipoxantina.- Base purínica soluble en ácidos y álcalis que resulta del catabolismo de la adenina y de la inosina (hipoxantosina), y que, a través de la etapa de xantina, es oxidada a ácido úrico. Presente en forma libre (en la orina) o en combinación (en los nucleósidos). Factor de crecimiento (factor X) para algunos microorganismos, antagoniza la acción inhibidora del crecimiento de las sulfamidas. Inosina (Hipoxantosina).- Nucleósido de purina; producto intermedio del metabolismo de las purinas. 4.

FUNDAMENTO

El ácido úrico es oxidado por la enzima específica uricasa generándose alantoína y H2O2, el cual en una reacción mediada por la enzima peroxidasa (POD), reacciona con el ácido 3,5-Dicloro-2-HidroxiBencensulfónico y 4-AAP produciéndose un compuesto coloreado con un máximo de absorción a 520 nm., en cantidad proporcional a la cantidad de ácido úrico presente en la muestra.

a.

Ácido úrico Complejo rosado

b.

H2O2 + 4-AAP + 3,5 DCBS Peroxidasa (reacción de oxidación)

Uricasa (reacción de oxidación)

Alantoína + H2O2 Alantoína.- Sustancia derivada de la oxidación del ácido úrico, que está presente en el alantoides, el líquido amniótico y la orina fetal. Se utiliza para estimular la regeneración epitelial de heridas y úlceras.

5.

PROCEDIMIENTO Tubo Blanco

Suero (mL) Standard Rvo. de trabajo

----1,0

Tubo Standard --0,025 1,0

M.P. 0,025 --1,0

Mezclar e incubar por 5 minutos a 37ºC. Leer a 520 nm. 6.

CÁLCULOS

[Ácido úrico] = (ABS 7. Varones Mujeres 8.

M.P

/ ABS

STD

) x 10

VALORES NORMALES 3,4 mg/dL – 7,0 mg/dL 2,4 mg/dL – 5,7 mg/dL IMPORTANCIA CLÍNICA

Niveles anormales de ácido úrico en suero son índice de desorden en el metabolismo de la sustancia que lo origina o defectos de eliminación. La hiperuricemia es típica, aunque no exclusiva, en la enfermedad de la gota; estudios epidemiológicos indican un alto porcentaje (alrededor del 83%) de pacientes con niveles de ácido úrico mayores de 9,0 mg/dL desarrollan artritis gotosa. En tales pacientes, se observan cristalizaciones del ácido úrico y sus sales en las membranas sinoviales de las articulaciones y en los tendones, causantes de las manifestaciones reumatológicas características. En menos proporción (10% a 25% de los casos) es posible encontrar depósitos de uratos en los túbulos o en el tejido intersticial del parénquima renal, con el consecuente riesgo de una insuficiencia renal irreversible en caso de persistir la hiperuricemia. También existen otros desórdenes que transcurren acompañados de hiperuricemia, tales como leucemia, policitemia, mieloma múltiple, intoxicación plúmbica, incluyendo alteraciones medicamentosas en los tratamientos con citostáticos o con tiazidas, Mientras que otros medicamentos (drogas uricosúricas tales como salicilatos y la fenilbutazona) aumentan la excreción del ácido úrico, disminuyendo los niveles séricos del mismo.