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UNIVERSIDAD PRIVADA NORBERT WIENER FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA ESCUELA ACADEMICA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
TOXICOLOGÍA Y QUÍMICA LEGAL
PRACTICA DE LABORATORIO:
“DETERMINACON DE ALCOHOLES ALIFATICOS. DIFERENCIACION DE ETANOL Y METANOL, DOSAJE ETILICO POR METODO DE MICRODIFUSION” INTEGRANTES:
Armijo Abrego, Wilmer Candia Acero, Sandra Manyari Perez, Lizeth Torres De La Cruz, Fernando
DOCENTE: Q.F Jesús Víctor Lizano Gutiérrez SECCIÓN: FB9N1
2017-I 1. INTRODUCCIÓN El alcohol es la principal droga de consumo por parte de la sociedad. Dos tercios de todos los abusos de substancias están relacionadas con el alcohol. El alcohol etílico es la sustancia psicoactiva de mayor consumo en el mundo. De acuerdo con el informe mundial sobre el consumo de drogas de la ONU del 2009, se estima que en el mundo cerca de 2.600 millones de personas lo consumen ya sea en forma ocasional, habitual, abusiva o adictiva. El etanol es un alcohol de gran importancia toxicológica dada su acción farmacológica depresora del sistema nervioso central, que cuando se consume en forma continuada y frecuente produce efectos adversos agudos y crónicos en la salud
“DETERMINACON DE ALCOHOLES ALIFATICOS. DIFERENCIACION DE ETANOL Y METANOL, DOSAJE ETILICO POR METODO DE MICRODIFUSION” humana. En intoxicación aguda se pueden presentar alteraciones en el sistema gastrointestinal, endocrino y en el equilibrio ácido básico. El consumo de etanol también se ha asociado con la presentación de varias alteraciones sociales como incremento en los índices de violencia intrafamiliar, violencia general, actos delictivos y accidentes de tránsito. Las vías de penetración posibles de los alcoholes son la digestiva, la respiratoria, y la absorción a través de la piel, es absorbido a partir de los 30 a 60 minutos y hasta 180 minutos, mediante un mecanismo de difusión pasiva, pasando al torrente sanguíneo. En ayunas, la absorción es más rápida en duodeno y yeyuno. Con el estómago lleno, la absorción se retarda. El alcohol, una vez en el torrente sanguíneo, pasa por el hígado, alcanzando su mayor concentración alrededor de los30 minutos en la circulación sistémica. Durante la absorción y la distribución se va produciendo también la biotransformación para luego producirse la biotransformación como tal y finalmente la eliminación. En el organismo, el alcohol sufre un proceso de oxidación, que se desarrolla exclusivamente en el hígado, transformándose el etanol en acetaldehído y posteriormente en acetato por medio de la cadena enzimática. Los metabolitos se excretan por vía pulmonar, vía urinaria, por la saliva y por la leche en época de lactancia. (Campos, 2005)Existen varios métodos para determinar la concentración de alcohol en un individuo como pruebas en sangre, orina y aliento, el utilizado en nuestra practica fue la determinación de alcohol en sangre por el método de microdifusión que se realiza en cámaras de Conway, las cuales poseen, en el compartimiento externo, muestra y agente liberador (CO3K2) y, en el interno, el agente atrapante Cr2O7K2 + H2SO4 0,01N. En este caso, se produce la captación y oxidación del etanol hacia ácido acético, forzándose la remoción completa del primer compuesto al cabo de un tiempo y temperatura previamente determinados, donde el dicromato, de color rojo anaranjado, oxida el etanol a acetaldehído y es reducido, a su vez, a cromo (III), de color verde, para luego poder ser medida la absorbancia en un espectrofotómetro UV.
2.
OBJETIVOS Entender la importancia de la realización del dosaje etílico. Comprender la metodología para la determinación de dosaje etílico. Determinar cuantitativamente el nivel de alcohol en la orina.
Metodología A. Método de microfusion – cámara de conway - espectrofotometrico
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“DETERMINACON DE ALCOHOLES ALIFATICOS. DIFERENCIACION DE ETANOL Y METANOL, DOSAJE ETILICO POR METODO DE MICRODIFUSION”
Agregar: 2.2ml Cr2O7K2ml 1ml de orina 1 ml CO3Na2 10% Tapar inmediatamente Llevar a baño María x 30’ Traspasar 2 ml de H2SO4 + Cr2O7K2 a una fiola de 10ml Enrasar con agua Leer a 450nm
B. Metanol Agregar:
2.2ml H2SO4 10% 1ml de orina 1 ml CO3Na2 10% Tapar inmediatamente Llevar a baño María x 30’ TOMAR EN 2 TUBOS 1ml H2SO4 10% (ambos) 0.1ml MnO4K210% ( tubo 2) Reposo x 5’ Tiosulfato 0.1ml (ambos) 4ml H2SO4 concent. (ambos) Baño María
C. Ácido cianhídrico
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“DETERMINACON DE ALCOHOLES ALIFATICOS. DIFERENCIACION DE ETANOL Y METANOL, DOSAJE ETILICO POR METODO DE MICRODIFUSION”
DESTILACIÓN
IDENTIFICACIÓN
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“DETERMINACON DE ALCOHOLES ALIFATICOS. DIFERENCIACION DE ETANOL Y METANOL, DOSAJE ETILICO POR METODO DE MICRODIFUSION”
Rx Cl3 Fe 5% Agregar:
1ml MP 0.5ml Cl3 Fe 10ml SO4 Fe 1ML HCl conc.
Rx. Azul de pruzia
Agregar: 1ml MP 0.5ml Ac. Pícrico Baño María
Rx. Rojo concha de vino Agregar:
Rx. Azul
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1ml MP Fenolftaleína H2SO4 hasta decolorar CO3K2 hasta que regrese el color grosella 10-20mg SO4Fe Agitar Reposo 30’ HCl concent.
“DETERMINACON DE ALCOHOLES ALIFATICOS. DIFERENCIACION DE ETANOL Y METANOL, DOSAJE ETILICO POR METODO DE MICRODIFUSION” 3. RESULTADOS METODO DE CONWAY Se realizó el procedimiento para el dosaje etílico en cámara de Conway y se hizo la lectura correspondiente en el espectrofotómetro a una longitud de onda: 450 nM
DO
ABSO RBAN CIA BLANC 3.240 O ESTAN 2.100 DAR MUES 4.232 TRA(R ON) Con los resultados de absorbancia se calculó el % de alcohol presente en la muestra utilizando la siguiente formula: % alcohol = [DO blanco – DO mx] x [ ] Estándar [DO blanco – DO Estandar] [ ] Estándar= 1 g % Resultado de concentración para el ron : - 0.87 g% (ver conclusiones)
DETERMINACION DE METANOL
No se observa el cambio de coloracion, ni la formación de un complejo rojizo por lo que se indica que el resultado para la prueba de Metanol en orina es NEGATIVO (ver conclusiones)
DETERMINACION DE ACIDO CIANHIDRICO
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“DETERMINACON DE ALCOHOLES ALIFATICOS. DIFERENCIACION DE ETANOL Y METANOL, DOSAJE ETILICO POR METODO DE MICRODIFUSION” Tubo 1: se observa la formación de un complejo azul, que es el ferrricianuro férrico que presenta una coloracion azul Prusia característica RESULTADO POSITIVO
Tubo 2: Se observa la formación de un complejo color concha de vino RESULTADO POSITIVO
4. CONCLUSIONES 1. Se obtuvo una concentración negativa ya que la absorbancia de la muestra problema, en un procedimiento correctamente ejecutado, no puede ser mayor a la absorbancia del blanco; esto indica un error que se pudo originar en varios puntos del procedimiento: Reactivo blanco contaminado o recipiente contaminado; muestra problema contaminada con sustancias interferentes que aumenten la absorbancia, incorrecta lectura de la absorbancia o celdas de lectura contaminadas. 2. La reacción para determinación de metanol generalmente se utiliza en toxicología para averiguar si una bebida ha sido adulterada o si una persona ha consumido una bebida con metanol, este alcohol es toxico por el metabolito que origina, formol. Se concluye que la bebida(ron) que se ingirió, no contenía metanol por la reacción negativa a la prueba. 3. Se concluye que la muestra brindada por el docente al grupo numero 3 contiene acido cianhídrico ya que las pruebas de determinación para el mismo son positivos.
5. CUESTIONARIO 1. REACCIONES QUIMICAS Mecanismo de reacción
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“DETERMINACON DE ALCOHOLES ALIFATICOS. DIFERENCIACION DE ETANOL Y METANOL, DOSAJE ETILICO POR METODO DE MICRODIFUSION” O H3C
OH
+
HO
Cr
O
H3C
OH
O
Cr
+
H2O
O
O
Etanol
OH
acido crómico
cromato acido de etilo (Éster) O
O
H3C O
Cr
OH
+
H2
H3C
O
Cr
H3C
OH
O
+
H2CrO 3
O
O H2O
Acetaldehído Inestable Luego: H2CrO 3
+
OH H3C
H2CrO 4
+
HCrO 3
HCrO 3
+
CH 2CHO
H2O
+
Cr
6+
Acetaldehído estable
Ecuación química balanceada K2CrO7
H2SO4
Mezcla sulfocromica crómico
[ H2Cr2O7 ]
H2O
inestable
2H2CrO4 acido
1. Importancia de la cámara de conway tanto en material de vidrio, porcelana y plástico y para que sirva? 8 TOXICOLOGIA Y QUIMICA LEGAL
+
H2O
“DETERMINACON DE ALCOHOLES ALIFATICOS. DIFERENCIACION DE ETANOL Y METANOL, DOSAJE ETILICO POR METODO DE MICRODIFUSION” La cámara de conway es un aparato en forma de capsula de Petri con tapa esmerilada. Concéntricamente tiene soldado un pequeño compartimiento circular de manera que queda un espacio pequeño interior y otro exterior. En la cámara exterior se pone un liquido que contiene un gas de tensión de vapor relativamente alta, y en el espacio interior un liquido que sea capaz de absorber este gas, con lo que el gas se difundirá desde el anillo exterior a la cámara interior sin que para ello sea preciso aplicar temperaturas elevadas. La cámara de conway cell sirve para la microdifusion de la orina y se utiliza en la determinación por microdifusion del metanol, etanol y monóxido de carbono en orina. La cámara de conway sirve también para la microdifusion de otras muestras como orina que contengan un gas de tensión de vapor relativamente alta. Las dimensiones de una cámara de conway son: Foso profundidad de 4 mm. Cámara profundidad diámetro es 10 x 60 mm. Centro de profundidad diámetro es 4x 35 mm
I.
BIBLIOGRAFÍA
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del
2017]
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http://www.academia.edu/8345688/Toxicologia
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“DETERMINACON DE ALCOHOLES ALIFATICOS. DIFERENCIACION DE ETANOL Y METANOL, DOSAJE ETILICO POR METODO DE MICRODIFUSION” 6. Prácticas de química orgánica I. unc [internet] 2015-2016. Disponible en: https://www.ucm.es/.../410-2014-10-07-GUION-PRACTICAS-QUIMICA %20ORGA... 7. Giannuzzi L. Manual de técnicas analíticas en laboratorio de toxicología. Slideshare [internet]. Disponible en: 8. https://es.slideshare.net/adnestelamartin/captulo-3-7409408 9. Gonzales J. Técnicas y métodos de laboratorio clínico. España. 3°ed. Elsevier Masson, 2010.
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