Microscopia

“Año de la Diversificación Productiva y del

Fortalecimiento de la Educación”. UNIVERSIDAD NACIONAL “DANIEL ALCIDES CARRIÓN”

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA ESCUELA DE FORMACIÓN PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

MICROSCOPIA

DOCENTE VITOR

:

ALUMNO Jhoffan B. G. SEMESTRE

Pasco-Perú

Ing. Lucio ROJAS :

MAYTA VALLE,

: I

Cerro de 2015

INTRODUCCIÓN: Este término se refiere al conjunto de técnicas y métodos destinados a hacer visible los objetos de estudio que por su pequeñez están fuera del rango de resolución del ojo normal. El microscopio es el elemento central de la microscopía, el uso del mismo se requiere para producir las imágenes adecuadas, de todo un conjunto de métodos y técnicas afines pero extrínsecas al aparato. Algunas de ellas son, técnicas de preparación y manejo de los objetos de estudio, técnicas de salida, procesamiento, interpretación y registro de imágenes, etc. HISTORIA Antonie van Leeuwenhoek (Holanda, 1632-1723), un vendedor de telas, aficionado a pulir lentes, logró fabricar lentes lo suficientemente poderosas como para observar bacterias, hongos y protozoos, a los que llamó "animálculos". El primer microscopio compuesto fue desarrollado por Robert Hooke. A partir de éste, los avances tecnológicos permitieron llegar a los modernos microscopios de nuestro tiempo, los que existen de varios tipos y son usados con diferentes fines. Hooke, utiliza un microscopio compuesto para estudiar cortes de corcho y describe los pequeños poros en forma de caja a los que él llamó "células". Publica su libro Micrographia.

El microscopio óptico compuesto.Es un instrumento que sirve para aumentar el tamaño de un objeto a través de un sistema de lentes. Puede conseguirse con este método aumento de hasta 1000 veces. Las partes que componen un microscopio se dividen en dos partes: Parte Mecánica: - Sistema de Soporte

El pie: Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma de Y o bien es rectangular. Tubo: Tiene forma cilíndrica y está ennegrecido internamente para evitar las molestias que ocasionan los reflejos de la luz. En su extremidad superior se colocan los oculares. Revólver: Es una pieza giratoria provista de orificios en los cuales se enroscan los objetivos. Al girar el revólver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posición de trabajo, la cual se nota por el ruido de un piñón que lo fija. Brazo: llamada columna o asa, es una pieza colocada en la parte posterior del aparato. Sostiene el tubo en su porción superior y por el extremo inferior se adapta al pie.

Platina: Es una pieza metálica plana en la que se coloca la preparación u objeto que se va a observar. Presenta un orificio en el eje óptico del tubo que permite el paso de los rayos luminosos a la preparación. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmóvil; en otros casos puede ser giratoria, es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares. -Sistema de Ajuste El tornillo macrométrico. Girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del microscopio, deslizándose en sentido vertical gracias a una cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rápido de la preparación. El tornillo micrométrico. Mediante el movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y nítido de la preparación. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm. que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.

Parte Óptica: -Fuente de Iluminación: Está constituido por una lámpara halógena de bajo voltaje (12V) situada en el pie del microscopio. La luz procedente de la bombilla pasa por un reflector que envía los rayos luminosos hacia la platina. -Condensador: Sistema de lentes convergentes que capta los rayos de luz y los concentra sobre la preparación, de manera que proporciona mayor o menos contraste. Se regula en altura mediante un tornillo. -Oculares: Son los sistemas de lentes más cercanos al ojo del observador, situados en la parte superior del microscopio. Son cilindros huecos provistos de lentes convergentes cuyo aumento se reseña en la parte superior de los mismos (normalmente 10X en los microscopios que se utilizarán en esta práctica). Dependiendo de que exista uno o dos oculares, los microscopios pueden se mono o binoculares. -Objetivos: Son sistemas de lentes convergentes que se acoplan en la parte inferior del tubo, mediante el revólver. En esta estructura se pueden acoplar varios objetivos (ordenados de forma creciente según sus aumentos, en el sentido de las agujas el reloj). Un anillo coloreado es distintivo de los aumentos de cada objetivo, que también van reseñados en el lateral del mismo. Algunos objetivos no enfocan bien la preparación al aire, y se deben de utilizar con un aceite de inmersión (normalmente van marcados con un anillo rojo). Estos objetivos de inmersión no se utilizarán normalmente en estas

prácticas.

LIMITE DE RESOLUCION: Es la distancia mínima que debe existir entre dos puntos del objeto para que puedan visualizarse separados. En los microscopios, el límite de resolución es en general inferior a 0,2 um. MANEJO DEL MICROSCOPIO OPTICO: Colocación De La Preparación Antes de colocar la preparación debemos asegurarnos de que está puesto el objetivo de menor aumento y que éste está suficientemente alejado de la platina. La preparación debe situarse de tal manera que el objeto de observación quede situado en el centro del orificio de la platina y, por supuesto, con el cubreobjetos hacia arriba. Enfoque Siempre se empieza enfocando con el objetivo de menor aumento. Mirando lateralmente el microscopio acercamos el objetivo a la preparación para después, mirando a través del ocular, enfocar alejándolo. La distancia a la que se debe colocar el objetivo de la preparación depende del aumento; con los objetivos de gran aumento (40 o 100x) debe estar muy cerca (1 mm o menos). Después de enfocar con el objetivo de menor aumento debemos centrar, moviendo muy lentamente la preparación, la zona más interesante, pasar al objetivo siguiente girando el revólver y corregir ligeramente el enfoque con el tornillo micrométrico. En todo momento hay que asegurarse de que al girar el revólver hemos anclado el objetivo perfectamente en su posición (existe un pequeño tope que nos lo indica). Corrección De La Iluminación Frecuentemente se consigue mejorar notablemente la imagen cerrando un poco el diafragma. Acostúmbrate a accionar el diafragma después de enfocar con cada objetivo hasta conseguir la mejor

visualización. Aunque normalmente la posición más elevada es la mejor, también puedes accionar el tornillo del condensador para buscar una mejor iluminación. Retirada De La Preparación Una vez acabada la observación se vuelve a poner el objetivo de menor aumento, se levanta el tubo y se retira la preparación. Si no va a seguir utilizándose el microscopio debe de cubrirse con su funda de plástico. En las prácticas en las que se realicen observaciones con el microscopio deberán hacerse dibujos de los objetos observados. Junto a estos dibujos debe ir una indicación de los aumentos con que se ha realizado la observación. Para saber el aumento total que estamos empleando se multiplica el aumento del ocular por el aumento del objetivo que estemos utilizando.

PRECAUCIONES Y MANTENIMIENTO 

Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posición de observación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no sobresale del borde de la



misma y dejarlo cubierto con su funda. Cuando no se está utilizando el microscopio,

hay

que

mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y dañen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo 

del polvo. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con

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un papel de óptica. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el microscopio.



Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con pañuelos especiales para

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óptica o con papel de filtro (menos recomendable). No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio



(macrométrico, micrométrico, platina, revólver y condensador). El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada a la preparación para prevenir el roce de la lente

con

la

muestra.

No

cambiar

nunca

de

objetivo

agarrándolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se está observando a través del ocular. Microscopio Estereoscopio (Lupa): Está diseñado para producir una imagen tridimensional estereoscópica. Ofrece una gran apertura numérica (NA) de 0.2, lo que produce una resolución de 600 pares de líneas por milímetro. Con esta resolución, puede trabajar de manera más eficiente y más precisa, así como también, obtener mucha más información a partir de las muestras. PARTES DEL EQUIPO: Pie o Base: Constituye la base sobre la que se apoya el estereoscopio y tiene por lo general una forma rectangular. Tubo: Tiene forma cilíndrica, en su extremidad superior se colocan los oculares. Brazo: Llamada también columna o asa, es una pieza en la parte posterior del aparato. Sostiene el tubo en su porción superior y por el extremo inferior se adapta al pie. Platina: Es una pieza metálica plana en la que se coloca la preparación u objeto que se va a observar. Objetivos: Es de 4.5x que nos ayuda a observar 4,5 veces más grande de lo natural. Oculares: Están colocados en la parte superior del tubo y su función es captar y ampliar la imagen obtenida por los objetos. TIPOS DE MICROSCOPIOS 

Microscopio óptico

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Microscopio simple

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Microscopio de luz ultravioleta

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Microscopio de fluorescencia

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Microscopio petrográfico

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Microscopio de campo oscuro

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Microscopio de contraste de fases

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Microscopio de luz polarizada

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Microscopio confocal

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Microscopio electrónico



Microscopio electrónico de transmisión



Microscopio electrónico de barrido

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Microscopio de iones en campo

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Microscopio de sonda de barrido

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Microscopio de efecto túnel

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Microscopio de fuerza atómica

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Microscopio virtual

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Estereomicroscopio binocular

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Microscopio de fuerza nuclear

HAY UNA GRAN VARIEDAD DE MICROSCOPIOS QUE ES PROBABLE QUE EN FUTURAS CLASES ESTUDIEMOS.

OBJETIVO: el objetivo de este informe es: -Reconocer las características fundamentales que constituyen el microscopio ya sea, compuesto estereoscopio. -Observar microorganismos con estos instrumentos. -Saber cuáles son las partes del microscopio.

MATERIALES:

-Microscopio óptico compuesto -Estereoscopio -Porta Objeto -Cubre Objeto -Muestra de agua PROCEDIMIENTO: Muestra de Agua (algas) un escorpión

Observando a

CUESTIONARIO: ¿Cuál es la diferencia entre microscopio simple y compuesto? Simple: utiliza una sola lente, el microscopio más básico (Ejm. lupa) Compuesto: utiliza varios objetivos para visualizar mejor los microorganismos ¿Qué importancia tiene el uso del microscopio en la biología celular? El microscopio en este contexto es muy importante, porque gracias a estos instrumentos es que uno puede observar y saber, como son, su forma, color, etc. ¿Por qué es necesario utilizar aceite de inmersión al utilizar el objetivo del mismo nombre? Para tener una mejor resolución y/o nitidez. Y también para no dañar al lente de los objetivos. ¿Qué significa resolución, poder de resolución y ampliación, asi mismo de que factores depende cada uno de ellos? Resolución: se refiere a la medición de pixeles de una imagen Poder de resolución: poder que tiene algún aparato de mejorar la nitidez de la imagen Ampliación: ampliar, agrandar. Factores: cada uno de estos depende de factores como, la imagen, los pixeles, la visión de cada individuo, si es de día o noche, etc.

CONCLUSIONES: Cualquier material y/o instrumento de laboratorio tiene una función, sea cual sea, y sin alguno de estos sería complicado hacer una investigación o un proyecto científico.