Prueba Oxidasa.docx

PRUEBA OXIDASA Fundamento: Esta prueba sirve para determinar la presencia de enzimas oxidasas. La reacción de la oxidasa se debe a la presencia de un sistema citocromooxidasa que activa la oxidación del citocromo que es reducido por el oxígeno molecular que produce agua o peróxido de hidrógeno según la especie bacteriana. El oxígeno actúa por tanto como aceptor final de electrones en la cadena transportadora de electrones. Por lo general, el sistema citocromooxidasa sólo se encuentra en los organismos aerobios, algunos anaerobios facultativos y, excepcionalmente, en algún microaerófilo, pero los anaerobios estrictos carecen de actividad oxidasa. (Faddin, 2003)

Procedimiento:   

Se toma con un palillo grueso de madera una muestra bacteriana a partir de una colonia aislada proveniente de un cultivo de 24h. La muestra se pone en contacto con la tira o disco impregnado. Se debe observar una coloración morada en un lapso no mayor a 30segundos para que sea positivo, de lo contrario el resultado es negativo. Control positivo: Pseudomonas aeruginosa. Control negativo:Escherichia coli.

La carencia de color en el disco se interpreta como oxidasa negativa. Interpretación: Colonias Oxidasa positivas: La colonia se vuelve de color rosa, luego marrón (rojo oscuro) y por ultimo negro. 1. Colonias rosa: a. Bacterias viables. b. Fase para subcultivos. 2. Colonias negras: a. Dentro de los 10- 15 seg b. Bacterias no viables Colonias oxidasa negativas 1. Sin cambios de color en las colonias o un color rosa pálido debido al reactivo .

2. Puede ocurrir un cambio de coloración al negro en el medio circundante. (Faddin, 2003)

Ayuda a la identificación de bacterias gramnegativas no entéricas : (Faddin, 2003) Especies de Acidovorax (+) Actinobacillus (+) Aeromonas (+) Afipia (+) Agrobacterium (+) Alcaligenes (+) Brevundimonas (+) Brucella (+) Campylobacter (+) Cardiobacterium hominis (+) Chromobacterium violaceum (+) Helicobacter (+) Neisseria (+) Moraxella (+)

Bibliografía Faddin, M. (2003). Pruebas Bioquimicas para la Identificacion de bacterias de Importancia Clinica . Buenos Aires : Médica panamericana.