Curs 6. Leucemii Acute

LEUCEMIILE ACUTE

BOALA MALIGNA: definitie 

Anomalie fenotipica



Monoclonalitate

HEMATOPOIEZA NORMALA 

Procesul de formare a elementelor celulare din sange

CFU = Unitati Formatoare de Colonii( CS angajate )

Linia mieloida

Celula stem multipotenta: - autoreplicare - migrare in sange periferic - diferentiere ( angajare )

Linia limfoida

HEMATOPOIEZA NORMALA

lipocit sinus

lipocit Vena centrala Celule endoteliale

megakariocit

HEMATOPOIEZA NORMALA Care este suportul genetic al procesului de diferentiere ?

CFU = Unitati Formatoare de Colonii( CS angajate )

Linia mieloida

rearanjament genic => diferentiere

Linia limfoida

Studiul celulelor hematopoietice: 

Examen citologic si histologic



Imunofenotipare



Biologie moleculara

Patologia maligna hematologica: clasificare

SINDROAME MIELOPROLIFERATIVE

SINDROAME LIMFOPROLIFERATIVE

SINDROAME MIELOPROLIFERATIVE

SINDROAME LIMFOPROLIFERATIVE

Acute: -LAM

Acute: -LAL

Cronice - PV - TE -_LGC - MMM

Cronice - LLC - HCL - LNH - BH - BW - MM

Leucemii Acute : Definitie  Leucemiile

acute ( LA) sunt un grup heterogen de boli maligne ale celulelor stem hematopoietice nediferentiate sau partial diferentiate.  Incidenta – 3-5 cazuri / 100 000 loc/ an - pred. sex masculin  Varsta

mediana: 62-65 ani pentru LAM 30-40 ani pentru LAL

Factori de risc pentru aparitia leucemiilor acute  Radiatiile ionizante  Substante

chimice si medicamente  Hipoplazia medulara  Factori genetici  Agenti virali

Radiatiile Ionizante:  Expunere

accidentala  Expunere profesionala  Expunere terapeutica

Factori de risc pentru aparitia leucemiilor acute  Radiatiile

ionizante  Substante chimice si medicamente  Hipoplazia medulara  Factori genetici  Agenti virali

Substante chimice si medicamente:  Benzen  Arsenic  Fenilbutazona  Cloramfenicol  Agenti

alchilanti  Inhibitori de topoisomeraza II

Factori de risc pentru aparitia leucemiilor acute  Radiatiile

ionizante  Substante chimice si medicamente  Hipoplazia medulara medular  Factori genetici  Agenti virali

Hipoplazia medulara  Anemia

aplastica dobandita  Anemia Fanconi  Hemoglobinuria paroxistica nocturna

Factori de risc pentru aparitia leucemiilor acute  Radiatiile

ionizante  Substante chimice si medicamente  Hipoplazia medulara  Factori genetici  Agenti virali

Factori genetici:

 Sindromul

Down  Sindromul Fanconi  Sindromul Bloom  Sindromul Klinefelter  Telangiectazia ereditara ataxica

Factori de risc pentru aparitia leucemiilor acute  Radiatiile

ionizante  Substante chimice si medicamente  Hipoplazia medulara  Factori genetici  Agenti virali

Agenti virali  HTLV1(

retrovirus )=> Limfomul / Leucemie cu celule T al adultului

Patogeneza leucemiilor acute:  Transformare

maligna clonala  Proliferarea unei populatii celulare imature si fara functie fiziologica

Hematopoieza leucemica: - monoclonala - blocare in maturatie / diferentiere - necontrolabila

Mecanismul transformarii leucemice: 1. ONCOGENE CELULARE Factori de crestere extracelulari

sis

Tirozin-kinaze membranare

fms, kit, erb-B

Transductori de semnal intracelular: a.) leaga GTP b.)Serina / Treonina kinaza c.) nuclear – factori de transcriptie -receptori pt vit. / hormoni - tirozin- kinaza

H-ras, K-ras, N-ras raf, mos jun, fos, myc, myb, ets, erb-A, RARA-α abl

2. GENE SUPRESOARE DE TUMORA

p53, Rb

3. INHIBITORI DE APOPTOZA

bcl-2

Rezultatul expansiunii populatiei leucemice:  Infiltrare

leucemica medulara=> insuficienta medulara  Infiltratie leucemica in tesuturi si organe

LEUCEMII ACUTE: tablou clinic Sindrom anemic  Sindrom infectios  Sindrom hemoragipar: - cutanat - mucos - visceral  Alte manifestari: - hipertrofie de organe - hipertrofie gingivala - neurologice - tumori mediastinale 

Hipertrofie gingivala – LAM 5

LEUCEMII ACUTE: diagnostic Criterii FAB: 1. Examen citologic ( SP / MO ) 2. Examen citochimic standard 3. Citochimia ultrastructurala 4. Examenul markerilor de suprafata si intracitoplasmatici = citometrie in flux 5. Citogenetica si biologie moleculara

LEUCEMII ACUTE: diagnostic

criterii FAB 1.

Examen citologic : - recunoasterea celulelor blastice - numararea blastilor in MO . > 20 % = leucemie acuta < 20 % = sindrom mielodisplazic

Leucemie acuta M1

Leucemie acuta limfoblastica

LEUCEMII ACUTE: diagnostic

criterii FAB 2. Examen citochimic : - PAS - Negru Sudan - Mieloperoxidaze - Esteraza - TDT

Blasti PAS +

Blasti MPOX +

Blasti Esterazo +

LEUCEMII ACUTE: diagnostic

criterii FAB 3. Citochimia ultrastructurala:

LEUCEMII ACUTE: diagnostic

criterii FAB 4. Examenul markerilor de suprafata si intracitoplasmatici ( imunofenotipare ) foloseste Ac. Monoclonali

Anticorpi Monoclonali

Citometria in flux

LEUCEMII ACUTE: diagnostic

criterii FAB 4. Examenul markerilor de suprafata si intracitoplasmatici ( imunofenotipare ) foloseste Ac. Monoclonali - LAL B - CD 10; CD 19; CD 20; CD 22 - LAL T - CD 1; CD 2; CD 3: CD 4; CD5; CD 7 ; CD 8 - LAM - CD13; CD33

LEUCEMII ACUTE: diagnostic

criterii FAB 5. Examenul citogenetic si biologie moleculara - citogenetica clasica

Examen citogenetic

Examen citogenetic

LEUCEMII ACUTE: diagnostic

criterii FAB 5. Examenul citogenetic si biologie moleculara - citogenetica clasica in LA t 8:14 (q24:q32) = LAL 3 t 15:17 (q22:q21) = LAM3 t 8:21 (q22:q22) =LAM 2

LEUCEMII ACUTE: diagnostic

criterii FAB 5. Examenul citogenetic si biologie moleculara - reactia de hibridizare fluorescenta in situ ( FISH )

LEUCEMII ACUTE: diagnostic

criterii FAB 5. Examenul citogenetic si biologie moleculara - PCR ( reactia in lant cu polimeraza ) - RT- PCR - secventializarea ADN

Examene de biologie moleculara = structura genei

LEUCEMII ACUTE: diagnostic

criterii FAB 5. Examenul citogenetic si biologie moleculara - PCR ( reactia in lant cu polimeraza ) - RT- PCR - secventializarea ADN Avantaje: - identifica celulele nediferentiate - demonstreaza caracterul clonal al proliferii - studiul bolii minime reziduale

CLASIFICAREA LEUCEMIILOR ACUTE: 

Leucemii acute limfoblastice (LAL )



Leucemii acute mieloide (LAM )

CLASIFICAREA LEUCEMIILOR ACUTE: Leucemii acute limfoblastice (LAL ) Citologic: L1 L2 L3 Imunofenotipic: LAL comuna ( CALLA +) LAL B ( Burkitt like) LAL T LAL null Genetic : 

CLASIFICAREA LEUCEMIILOR ACUTE:  Leucemii

acute mieloida ( LAM ): - LA mieloida cu diferentire minima(LAM-M0 ) - LA mieloida fara maturatie (LAM-M1 ) - LA mieloida cu maturatie (LAM-M2 ) - LA promielocitara (LAM-M3 / LAP ) - LA mielo- monocitara (LAM-M4 ) - LA monocitara (LAM-M5 ) - Eritroleucemia (LAM-M6 ) - LA megacariocitara (LAM-M7 )

Leucemia acuta promielocitara - particularitati: - citologice  corpi AUER - biologice => CID - citogenetic => t 15:17 (q22:q21) => onc PML / RAR alfa

TRATAMENTUL LEUCEMIILOR ACUTE: 

Principii:



Criterii de remisiune completa: - < 5% blasti in MO - sange periferic normal - absenta altor determinari de boala



Remisiune moleculara

TRATAMENTUL LEUCEMIILOR ACUTE: 

Tratamentul LA are 2 faze: 1. Faza de inductie: chimioterapie agresiva pentru obtinerea RC. LAL: VCR, Cortizon, FRB, L-ASP, CFA, MTX, ARA-C LAM: FRB, ARA-C 2. Faza de postinductie are 2 etape: - intretinere - intensificare ( consolidare )

TRATAMENTUL LEUCEMIILOR ACUTE: Terapie speciala:  Terapie ajutatoare: - terapia suportiva - substitutie – ME - MG - MT (afereza Tb) - terapia infectiilor - factori de crestere - reechilibrare H-E si metabolica - psihoterapia - izolare 



TRATAMENTUL LEUCEMIILOR ACUTE: Transplantul de celule stem hematopoietice (CSH): - in functie de sursa de CSH : => allotransplant => autotransplant - in functie de modalitatea de recoltare a CSH: => CSH (CD 34 + ) din maduva osoasa => CSH (CD 34 + ) din sangele periferic prin citafereza => CSH ( CD 34 + ) din cordonul ombilical

TRATAMENTUL LEUCEMIILOR ACUTE:  Transplantul de celule stem hematopietice rezultate: Supravietuire libera de boala (Leukemia free survival) la 3 ani. LAL prima RC a doua RC LAM prima RC a doua RC

Transplant CSH

Chimioterapie

30-60 % 30-50 %

20-70 % 10 %

40-60 % 30 %

10-50 % 10 %