Cocos Gram Positivos

COCOS GRAM POSITIVO

Lic. TM Manuel Quintanilla C. [email protected]

CONTENIDO:

OBJETIVOS:  Diferenciar

los

diferentes

morfotipos de cocos según el Gram

 Cocos Gram positivos patógenos  Morfotipos  Géneros  Características biológicas  Diferenciación bioquímica

 Diferenciar

los

géneros

Staphylococcus, Streptococcus y Enterococcus características

según

sus

morfológicas,

tintoriales y bioquímicas.  Describir

los

pasos

para

identificación de los diferentes géneros de cocos Gram positivos

COCOS GRAM POSITIVOS GÉNEROS DE IMPORTANCIA CLÍNICA

GÉNERO

GÉNERO

GÉNERO

STAPHYLOCOCCUS

STREPTOCOCCUS

ENTEROCOCCUS

Clasificación de Lancefield: Grupo A Grupo B Grupo C Grupo D

No Enterococcus: Streptococcus bovis No tipificables

1984 Estudios ADN

GENERALIDADES: Cocos Gram positivo Tienen forma redondeada y se presentan en

pares o en grupos en forma de racimos de uva. Inmóviles No forman esporas Aerobios y anaerobios facultativos Crecen a una temperatura óptima entre 30-37 ºC.

Tinción de Gram

Son catalasa positiva Fáciles de cultivar Resistente a

concentraciones de sal (7%) Muy activos

metabolicamente: Fermentan azúcares Algunos producen

pigmentos

Agar Salado Manitol 7%

ESPECIES DE IMPORTANCIA CLINICA Flora normal, pero potencialmente patógenos en casos de paciente inmunocomprometidos

Staphylococcus aureus

Staphylococcus epidermidis

Staphylococcus saprophyticus

CARACTERISTICAS :

● Beta Hemolítico

● Produce pigmentos (algunas cepas)

● Manitol positivo

● Coagulasa positivo

FACTORES DE PATOGENICIDAD: ESTRUCTURA CELULAR

Proteína A

Ig G

Cápsula: Inhibe la fagocitosis

Pared celular

Peptidoglicano Ac. Teicóico: Adherencia inespecífica

Adhesinas: Proteínas de superficie que favorece al anclaje a la célula huésped.

FACTORES DE PATOGENICIDAD: FACTORES SOLUBLES ENZIMAS (Invasinas):  Hialuronidasa  Lipasas  Nucleasa  Coagulasa  Estafiloquinasa TOXINAS:  Leucocidina  Hemolisinas  Toxina del sindrome del shock tóxico (TSST-1)  Exfoliativa: sindrome de la “piel escaldada”

PRODUCTOS CELULARES: ENZIMAS (Invasinas): Hialuronidasa Lipasas Proteasas

Difusión de la bacteria en los tejidos.

Nucleasa

Coagulasa: Transforma el fibrinógeno en fibrina formando una capa protectora

EXOTOXINAS:

● Leucocidina: Toxina que produce lisis de polimorfonucleares y de macrófagos ● Hemolisinas: Cuatro tipos de toxinas (alfa, beta, gamma y delta) lisan gróbulos rojos, leucocitos y la alfa es también dermonecrótica.

● Exfoliativa: Toxina del sindrome de la “piel escaldada” ● Toxina del Sindrome del Shock Tóxico (TSST-1): provoca los síntomas del SST. ENTEROTOXINAS

● Enterotoxinas: Hay 7 tipos diferentes que producen intoxicación alimentaria

CARACTERISTICAS :

● Coagulasa negativo ● No hemolíticos ● Crece a 7% NaCl ● No fermenta Manitol ● Sensible a la Novobiocina FACTORES DE PATOGENICIDAD:

● Presenta un glicocalix de protección ● Adherencia a superficies plásticas y metálicas

CARACTERISTICAS :

● No contiene proteína A ● Coagulasa negativa ● No hemolítico ● Crece a 7% NaCl ● No fermenta Manitol ● Resistente a la Novobiocina FACTORES DE PATOGENICIDAD:

● Receptores oligosacáridos específicos de células de la uretra

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

?

COCOS GRAM POSITIVOS CATALASA

NEGATIVAS GÉNERO

Streptococcus

? REDUCCIÓN DE NITRATOS

POSITIVAS GÉNERO

Staphylococcus

PRUEBAS BIOQUÍMICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS: S E N S I B IL I D A D

COCOS GRAM POSITIVOS CATALASA REDUCCIÓN DE NITRATOS POSITIVAS

?

● S. aureus

COAGULASA

● S. epidermidis

A

● S. saprophyticus

POSITIVA Staphylococcus aureus

+

NEGATIVA S. epidermidis S. saprophyticus

-

?

L A

N O V O B I O C I N A

SENSIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA SENSIBLE - SIN CRECIMIENTO

S. epidermidis

RESISTENTE - CON CRECIMIENTO

S. saprophyticus

M O R F O T I P O S

CARACTERISTICAS DEL GÉNERO

● Cocos Gram positivos dispuestos en cadenas o en pares

Catalasa negativo

● No poseen cápsula : Excepto los Streptococcus pneumoniae ● No son esporulados

• Producen diferentes patrones de ALFA BETA

hemólisis • Aerobios facultativos

GAMMA

• Muy exigentes en cuanto a

requerimientos nutritivos • Fermentan azucares sin producir gas

- +

CLASIFICACIÓN SEGÚN EL TIPO DE HEMÓLISIS Enterococcus sp ( algunas cepas)

Enterococcus sp ( algunas cepas)

Streptococcus pneumoniae Streptococcus viridans

Grupo D no Enterococcus (Streptococcus bovis) Enterococcus sp.

Streptococcus pyogenes

Streptococcus agalactiae

CLASIFICACIÓN SEGÚN EL CARBOHIDRATO DE PARED CELULAR ● Clasificación de Rebeca Lancefield (1933) ● Sólo para los beta hemolíticos según el carbohidrato de pared especifico de grupo

Enterococcus sp. GRUPO D (ac. Teicóico) GRUPO C y G

Streptococcus pyogenes GRUPO A

Streptococcus agalactiae GRUPO B

CLASIFICACION SEGÚN SUS DIFERENCIAS FISIOLÓGICAS Y BIOQUÍMICAS: Se establecen diferencias entre las 65 especies que componen este género. ● Se utilizan galerías de identificación específicas, como la galería API Strep ● Posee más de 20 pruebas bioquímicas API 20 Strep

ENFERMEDADES

FACTORES DE PATOGENICIDAD Streptococcus pyogenes

● Diplococos Gram positivos ● Sensibles a la Optoquina Poseen cápsula

FACTOR DE VIRULENCIA

Factores de patogenicidad: 1.- Cápsula 2.- Enzimas: neuraminidase > factor de difusión 3.- Toxinas:

● Hemolisina dermatotóxica (neumolisina) ● Leucocidina

Alfa hemolíticos

CARACTERÍSTICAS:

Streptococcus agalactiae

● Son beta hemolíticos

● Hidrolisan el hipurato

+

-

S. aureus

● Prueba de CAMP:

El estreptococo del S. agalactiae grupo B produce un factor que aumenta la beta hemólisis de una cepa indicadora de S. aureus.

S.pyogenes

Factores de patogenicidad: Neuraminidasa, proteasa, hialuronidasa, y hemolisina.

CARACTERÍSTICAS:

● Morfotipo: Diplococos ● Aerobios facultativos ● Hemólisis Gamma (No hemoliticos) ● Poco exigentes para cultivar ● Crecen a 6,5% de NaCl ● 12 Especies: Flora normal intestinal Enterococcus faecalis

85-90%

Enterococcus faecium

5-10%

● Enfermedades nosocomiales: Resistencia natural a cefalosporinas y otros antibióticos

FACTORES DE PATOGENICIDAD: citolisinas, hialuronidasas, beta lactamasa CLASIFICACIÓN POR PRUEBAS BIOQUÍMICAS: 1. HIDRÓLISIS DE BILIS-ESCULINA: Todos lo Streptococcus del Grupo D son Bilis-esculina POSITIVO 2. CRECIMIENTO EN SOLUCIÓN SALINA AL 6,5%

+

-

● Enterococcus (Enterococcus faecalis , Enterococcus faecium) : CRECEN ● No Enterococcus (Streptococcus bovis): NO CRECEN

+ -

CARACTERISTICAS:

● Habitan la boca principalmente: Flora normal ● Responsables de las caries ● Hemólisis Alfa Streptococcus mutans Streptococcus mitis Streptococcus salivarium Streptococcus sanguis

● No son tipificables con las pruebas anteriores

COCOS GRAM POSITIVOS (Grupos)

Coagulasa

(Cadenas y pares)

Hemolisis

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE COCOS GRAM POSITIVOS MUESTRA: Extendido y frotis para Tinción de Gram

?

● Exudado faringeo ● Pus ● Sangre ● LCR EN

IMO C RA

S

1. EXAMEN DIRECTO: Tinción de Gram Cocos Gram positivos

EN CA DE

NA S

?

2. PRUEBAS BIOQUÍMICA: COCOS GRAM POSITIVOS CATALASA REDUCCIÓN DE NITRATOS POSITIVAS

NEGATIVAS

● S. aureus

Streptococcus

?

● S. epidermidis

● S. saprophyticus COAGULASA POSITIVA Staphylococcus aureus

SENSIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA

NEGATIVA S. epidermidis S. saprophyticus

?

SENSIBLE-SIN CRECIMIENTO

S.

RESISTENTE-CON CRECIMIENTO

S. saprophyticus

Streptococcus 3.- CULTIVO EN AGAR SANGRE: Agar sangre en 10% CO2:

ALFA

GAMMA

BETA

S. pneumoniae Sensible a Optoquina

Enterococcus sp (Grupo-D) Crece en NaCl 6,5%

S. pyogenes (Grupo-A) Sensible a Bacitracina

Grupo Viridans Reacciones bioquímicas

Grupo-D No Enterococcus No crece en NaCl 6,5%

S. agalactiae (GrupoB) Prueba Camp positiva

AUTOEVALUACIÓN Metacognición

PRUEBA BIOQUÍMICA

Coagulasa

STAPHYLOCOCCUS AUREUS

STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS

STAPHYLOCOCCUS SAPROPHYTICUS

POSITIVO

NEGATIVO

NEGATIVO

Produce pigmentos

SI

NO

NO

Crece a 7% NaCl

SI

SI

SI

SI

NO

NO

-----

SI

NO

Fermenta Manitol

Sensibilidad a la Novobiocina

TIPO DE HEMÓLISIS