Cultivo De Bacterias

TEMA:

• Las

bacterias se pueden cultivar en el laboratorio gracias a los denominados cultivos de bacterias.

• Un cultivo de bacterias es una técnica que aprovecha la capacidad de división celular que tienen las bacterias para obtener gran cantidad de bacterias a partir de unas Bacterias obtenidas pocas. durante su cultivo

Bacterias introducidas en el cultivo

 El

desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve afectado por una serie de factores de gran importancia y que, en algunos casos, son ajenos por completo al propio medio.

 Para

que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuadas, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.

 1:disponibilidad

de nutrientes

adecuados  2:consistencia adecuada del medio  3. presencia (o ausencia) de oxígeno y otros gases  4. condiciones adecuadas de humedad  5:Luz ambiental  6:pH  7:Temperatura  8:Esterilidad del medio

 Temperatura

de crecimiento óptimo: Es la temperatura en que se obtiene el máximo desarrollo  en el tiempo mínimo (de 12 a 24 hs. en general). Esta temperatura puede no ser la óptima para el  desarrollo de diversas características del microorganismo, como: Pigmentación y Morfología.

 Termófilas

facultativas: Termotolerantes desarrollan bien a menos de 45ºC y a temperaturas superiores.  Termófilas extremo: Temperatura óptima de crecimiento es 65ºC (termos acuáticus).  Hipertermófilo: Temperatura óptima de crecimiento es 80-100ºC.  Temperatura de crecimiento óptimo: Es la temperatura en que se obtiene el máximo desarrollo en el tiempo mínimo (de 12 a 24 hs. en general). Esta temperatura puede no ser la óptima para el desarrollo de diversas características del microorganismo, como: Pigmentación y morfología.

 En

general el pH óptimo de desarrollo es 6,5 a 7,5; los límites máximos oscilan entre 4,0 y 9,0.  El pH del medio es modificado por los productos terminales del metabolismo: ejm a)

Alcalinización del medio:

 por

desaminación de proteínas o por oxidación de compuestos aniónicos como succinato sódico, liberando carbonato sódico.

b) la

Acidificación del medio:

fermentación de hidratos de carbono baja el pH. En ciertos casos los productos ácidos del metabolismo pueden inhibir el desarrollo. Para contrarrestar estos hechos a veces se agregan a los medios de cultivo amortiguadores de pH.

 Para

la elección del medio de cultivo y condiciones de incubación, debemos tener en cuenta las siguientes características de las bacterias:  a- Si son aerobias, anaerobias o microaerófilas.  b- Si son autotróficas o heterotróficas.  c- Si son heterotrofas, considerar si son exigentes o no.  d- Si son psicrófilas, mesófilas o termófilas.  e- Si tienen algún otro requerimiento específico.

 MEDIOS

SINTÉTICOS O DEFINIDOS: SE CONOCE LA COMPOSICIÓN QUÍMICA Y CANTIDADES DE COMPONENTES  MEDIOS COMPLEJOS: CONTIENEN ALGUNOS COMPONENTES DE COMPOSICIÓN QUÍMICA NO TOTALMENTE DEFINIDA

 SIMPLES: BAJOS

REQUERIMIENTOS  ENRIQUECIDOS: ADICIÓN DE SANGRE, SUERO, etc.  SELECTIVOS: FAVORECEN EL CRECIMIENTO DE ALGUNOS TIPOS DE ORGANISMOS  DIFERENCIALES: DESTACAN CARACTE-RÍSTICAS PROPIAS DE UN ORGANISMO

 EN

PLACA POR ESTRÍA

 EN

PLACA EN SUPERFICIE O POR

EXTENSIÓN  EN

PROFUNDIDAD O POR VERTIDO

SIEMBRA POR ESTRÍA

 PSICRÓFILOS

(0º - 15º - 20º)  PSICRÓFILOS FACULTATIVOS: CRECEN A 0º, MÁXIMA ENTRE 20-30º Y RESISTEN HASTA 40ºC  RESPONSABLES DE PUTREFACCIÓN DE ALIMENTOS REFRIGERADOS

 MESÓFILOS: RANGO

ENTRE 15 Y

45ºC (MAYORÍA DE PATÓGENOS DE ANIMALES Y HOMBRE)  TERMÓFILOS: ÓPTIMA

POR

ENCIMA DE 45ºC Y MÁXIMA

SUPERIOR A 65ºC

Clasificación de los microorganismos de acuerdo a su tolerancia al O2

a)

Aerobios estrictos

b)

Anaerobios estrictos

c)

Anaerobios facultativos

d)

Microaerófilos

e)

Anaeobios aerotolerantes

 Agar nutritivo:  El

Agar nutritivo es un medio de cultivo usado normalmente como rutina para todo tipo de bacteria. Es muy util porque permanece solido incluso a relativas altas temperaturas. Además, el crecimiento bacteriano en este agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen mejor las colonias pequeñas.

Es

un medio enriquecido que se utiliza además para la investigación de los diversos tipos de hemólisis(α, ß ó gamma ). Se utiliza para el crecimiento de estreptococos.

 Agar Hektoen :

  Es

un medio más diferencial y menos selectivo que el agar SS. Se utiliza para facilitar el aislamiento de las enterobacterias. La presencia de tres azúcares (lactosa, sacarosa y salicilina ) permiten ampliar el poder diferencial de este medio.

  El

Agar Mueller Hinton es un medio utilizado para realizar las pruebas de susceptibilidad antimicrobiana en microorganismos aeróbicos por el método de Bauer-Kirby. Este medio también es conocido como Agar M-H.